• Предисловие редактора перевода ^ .,-.'-
Хроматография в настоящее время является наиболее широко используемым аналитическим методом. Она активно применяется в научных исследованиях, в различных отраслях промышленности, в медицине, а также для контроля окружающей среды. Исследуя состав разнообразных сложных смесей, хроматография выполняет одну из важнейших задач химической науки, о которой говорил еще М. В. Ломоносов в «Слове о пользе химии». «К точному и подробному познанию какой-либо вещи, —писал он в 1751 г., —должно знать части, которые' оную составляют. И хотя в нынешние века изобретенные микроскопы силу зрения нашего так увеличили, что в едва видимой пылинке весьма многие части ясно распознать можно, однако сим полезные инструменты служат только к исследованию органических яв частей, каковы суть весьма тонкие и невидимые простым глазом пузырьки и трубочки, составляющие твердые части животных и растущих веществ; а тех частиц, из которых состоят смешанные материи, особливо зрению представить не могут. И потому познание оных только через химию доходить должно».
Важными особенностями хроматографии, открытой в начале нашего столетия М. С. Цветом, являются высокая селективность, большая чувствительность и универсальность. Хроматография применима для исследования практически всех веществ: газообразных, жидких и твердых. Необычайно широк и круг анализируемых этим методом объектов •— от полимеров, пищевых продуктов, микроорганизмов, белков, нефти, металлов, руд до атмосферы планет Солнечной системы и состава лунного грунта.
Хроматография, таким образом, вносит важный вклад в решение одного из важнейших направлений химической науки — аналитической химии. Новое «хроматографическое зрение» химика позволило сделать много важных открытий. В частности, свыше десяти Нобелевских премий было присуждено за исследования, в которых активно использовались хромато-графические методы.
Для выполнения хроматографического анализа применяется стандартное, коммерчески доступное оборудование, причем процесс анализа как в промышленности на потоке, так и в условиях лаборатории часто проводится в автоматическом ре-
Содержание
Предисловие редактора перевода .......... . 5
Предисловие ................ 7
Предисловие редактора американского издания ....... 9
Предисловие к русскому изданию........... 10
Глава 1. Обзор методов хроматографии и электрофореза.
Эрих Хефтман........... И
1.1. Классификация............ 11
1.2. Колоночная хроматография.......... 14
1.3. Плоскостная хроматография........... 21
1.4. Газовая хроматография........... 25
1.5. Электрофорез.............. 27
1.6. Выводы............... 30
Литература................ 34
Глава 2. Аминокислоты и олигопептиды. Томас Кастер, 37
Алонс Нидервизер........
2.1. Введение............... 37
2.2. Ионообменная хроматография......... 37
2.2.1. Аминокислоты и олигопептиды ,..... 37
2.2.2. Разделение аминокислот, дипептидов и олигопептидов . . 41
2.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография аминокислот и пептидов............... 43
2.3.1. Детекторы.............. 43
2.3.1.1. Ультрафиолетовые детекторы........ 44
2.3.1.2. Флуориметрические детекторы....... 45
2.3.1.3. Электрохимические детекторы....., 45
2.3.1.4. Масс-спектрометры.......... 46
2.3.2. Разделение аминокислот.......... 51
2.3.3. Разделение энантиомеров аминокислот...... 56
2.3.4. Разделение олигопептидов......... 59
2.4. Газовая хроматография........... 68
2.4.1. Газовая хроматография аминокислот...... 69
2.4.1.1. Очистка препаратов.......... 69
2.4.1.2. Получение производных.......... 69
2.4.1.3. Триметилсилильные производные...... 70
2.4.1.4. Эфиры ациламинокислот......... 74
2.4.1.5. Разделение энантиомеров......... 79
2.4.1.5.1. Разделение на оптически активных неподвижных
фазах............. 79
: 2.4.1.5.2. Разделение диастереомеров....... 81
333
Содержание 334
2.4.2. Газовая хроматография пептидов....... 82
2.4.2.1. Производные пептидов......... 83
2.4.2.2. Разделение пептидов.......... 83
2.5. Масс-спектрометрия . . ........ 84
2.5.1. Хроматомасс-спектрометрия . . . ...... 85
2.5.1.1. Аминокислоты............ 85
2.5.1.2 Олигопептиды............ 88
Литература................ 94
Глава 3. Белки. Николас Кацимпулас....... 104
3.1. Введение............... 104
3.2 Хроматография белков........... 106
3.2.1. Гель-хроматография........... 106
3.2.2. Ионообменная хроматография........ 108
3.2.3. Аффинная хроматография......... 109
3.2.4. Адсорбционная хроматография........ 110
3.2.5. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . . 1П
3.3. Электрофорез белков............ 111
3.3.1. Общая классификация методов........ 111
, 3.3.2. Приборы для аналитического электрофореза..... 115
3..3.3. Аппаратура для аналитического разделения на носителях
'• ' различного типа............ 115
• 3.3.4. Аппаратура для препаративного разделения в жидких ере- _
дах................ 116
3.3.5. Электролитические системы......... 118
3.3.6. Зонный электрофорез при постоянном значении рН . . 119
3.3.7. Изотахофорез............. 120
3.3.8. Многофазный зонный электрофорез (диск-электрофорез) 122
3.3.9. Электрофоретическое удерживание в полиакриламидных гелях ................ 123
3.4. Изоэлектрическое фокусирование......... 124
Литература................ 127
Глава 4. Липиды. Арнис Куксис......... 130
4.1. Введение............... 130
4.2. Получение экстрактов липидов......... 131
4.2.1. Экстракция липидов из тканей . . •...... 131
. 4.2.2. Элюирование липидов с адсорбентов...... 133
•-:• 4.2.3. Меры предосторожности, необходимые при работе с образцами липидов............. 134
; 4.3. Разделение липидов различных классов....... 135
; 4.3.1. Разделение полярных и неполярных липидов . . . . 135
4.3.1.1. Колоночная хроматография........ 135
4.3.1.2. Тонкослойная хроматография....... 136
\: 4.3.2. Выделение неполярных липидов различных классов . . 137
'''.* 4.3.2.1. Колоночная хроматография........ 13'
••> 4.3.2.2. Тонкослойная хроматография....... '40
1 4.3.3. Выделение фосфолипидов различных классов .... 147
• i 4.3.3.1. Колоночная хроматография........ 147
: 4.3.3.2. Тонкослойная хроматография....... 151
' ' 4.3А. Выделение гликолипидов различных классов . 159
4.3.4.1. Колоночная хроматография........ J59
4.3.4.2. Тонкослойная хроматография....... j°^
4.4. Разделение смесей липидов на индивидуальные соединения . . . |Ь7
4.4.1. Жирные кислоты . ........... *°
4.4.1.1. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра ............. 167
4.4.1.2. Газо-жидкостная хроматография....... 170
4.4.1.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 174 ' 4.4.2. Окисленные жирные кислоты и простагландины . . . 176 ;. 4.4.2.1. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра 176
4.4.2.2. Газо-жидкостная хроматография....... 178
1 4.4.2.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 180
; 4.4.3. Нейтральные ацилглицерины......... 182
; 4.4.3.1. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра 183
;: 4.4.3.2. Газо-жидкостная хроматография....... 185
4.4.3.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 191 \-. 4.4.4. Церамиды.............. 194
4.4.4.1. Адсорбционная хроматография....... 194
. 4.4.4.2. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра 195
,= 4.4.4.3. Газо-жидкостная хроматография....... 196
i 4.4.4.4. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 197
i 4.4.5. Глицерофосфолипиды и сфингомиелины . . . . . . 197
4.4.5.1. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра 198
':"' 4.4.5.2. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 199
4.4.6. Гликолипиды............. 201
"' 4.4.6.1. Хроматография на носителях, содержащих ионы серебра 201
с 4.4.6.2. Газо-жидкостная хроматография....... 202
~ 4.4.6.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . 203
; 4.5. Определение общего состава липидов....... 204
;: 4.5.1. Тонкослойная хроматография .,'........ 204
.: 4.5.2. Газо-жидкостная хроматография........ 207
4.5.3. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . . 208
4.6. Выводы................ 210
Литература................ 211
Глава 5. Терпены. Родней Кротью, Роберт К. Рональд . 229
5.1. Введение............... 229
5.2. Гемитерпены, мевалоновая кислота и родственные соединения 230
5.3. Монотерпены.............. 232
5.3.1. Газо-жидкостная хроматография........ 232
5.3.2. Тонкослойная хроматография......... 237
5.3.3. Колоночная хроматография......... 238
5.4. Сесквитерпены.............. 239
5.4.1. Газо-жидкостная хроматография........ 241
5.4.2. Тонкослойная и колоночная хроматография..... 242
5.5. Дитерпены............... 243
5.5.1. Газо-жидкостная хроматография........ 243
5.5.2. Тонкослойная хроматография......... 244
5.5.3. Колоночная хроматография......... 245
5.6. Сестеротерпены............. 246
5.7. Тритерпены............... 246
5.7.1. Газо-жидкостная хроматография........ 246
5.7.2. Тонкослойная хроматография........ 247
5.7.3. Колоночная хроматография......... 247
5.8. Тетратерпены.............. 248
5.8.1. Высокоэффективная жидкостная хроматография . . . 248
5.8.2. Тонкослойная хроматография . ... . . . . 251
5.8.3. Газо-жидкостная хроматография . ....... 253
5.9. Полипренолы.............. 254
5.9.1. Газо-жидкостная хроматография........ 254
